Данные денситометрии, полученные для вестерн-блоттинга, обычно используются для сравнения содержания белка между образцами. … Данные нелинейной денситометрии наблюдались при обнаружении вестерн-блотов с использованием инфракрасной флуоресценции или хемилюминесценции и при различных условиях SDS-PAGE.
Что такое денситометрический анализ?
Денситометрия – это количественное измерение оптической плотности светочувствительных материалов, таких как фотобумага или фотопленка, под воздействием света.
Как вы используете денситометрию в Image J?
Денситометрия с использованием ImageJ
- Нажмите на центр квадрата и перетащите его на следующую дорожку. …
- Для последней полосы повторите процедуру, но нажмите Ctrl и 3, чтобы установить последнюю полосу. …
- Используйте инструмент линии, чтобы нарисовать линии, чтобы исключить фон дорожки из расчетов. …
- Перейдите к: Анализ→Гели→Отметить пики, чтобы получить отчет.
Как вы анализируете результаты вестерн-блоттинга?
Подтвердите свои инструменты количественного анализа . Например, запустите блот, где дорожки загружены 20 мкг, 15 мкг и 10 мкг общего белка. После анализа относительное количественное определение целевых полос должно быть 2, 1,5 и 1. Пробуйте различные инструменты и настройки количественного анализа, пока не сможете надежно воспроизвести правильные результаты.
Как вы оцениваете вестерн-блоттинг?
Шаг 1: Определите вычитаемый фонплотности интересующего белка (PI) и нормализующего контроля (NC). Шаг 2: Определите NC с самым высоким значением плотности. Шаг 3: Разделите все значения NC на наибольшее значение плотности NC, чтобы получить относительное значение NC.
