Загрузка контрольных антител является важным контролем, поскольку они указывают на одинаковую загрузку образцов во все лунки. Контроль загрузки также показывает правильный перенос белков на мембрану во время процесса вестерн-блоттинга. Контролем загрузки обычно являются белки с высокой и повсеместной экспрессией.
Что делает контроль загрузки?
Нагрузочный контроль представляет собой белок, используемый в качестве контроля в эксперименте по вестерн-блоттингу. … Они используются, чтобы убедиться, что белок загружен одинаково во все лунки.
Почему мы используем контроль загрузки в вестерн-блоттинге?
Элементы управления загрузкой играют вторую роль в вестерн-блоттингах. Их можно использовать для проверки равномерности переноса от геля к мембране по всему гелю. Это необходимо при сравнении уровней экспрессии белков между образцами.
Как вы используете контроль загрузки в вестерн-блоттинге?
Сигналы от контроля загрузки обычно используются для нормализации сигналов от интересующих белков. Чтобы использовать для этих целей нагрузочный контроль, детекцию с помощью контрольного белка-антитела и экспериментального антитела следует проводить на одном и том же блоте. В качестве контроля загрузки используются различные белки.
Почему актин используется для контроля нагрузки?
Бета-актин обычно используется в качестве контроля загрузки для Вестерн-блоттинганормализовать обнаруженные уровни белка, подтвердив, что белковая нагрузка одинакова по всему гелю.