Вы также можете обессолить образец с помощью ультрафильтрации до 1 десятой части предыдущего объема, затем снова разбавить и повторить этап ультрафильтрации. Лучшим методом обессоливания является обессоливание гель-фильтрацией против 50 мМ буфера, чем ультрафильтрация (классическая, а не центробежная).
Что такое обессоливание при очистке белка?
Обессоливание используется для удаления солей из белковых растворов, фенола или невключенных нуклеотидов из нуклеиновых кислот или избытка реагентов для сшивания или мечения из конъюгированных белков.
Как вы очищаете белки?
При очистке нерасфасованного белка первым шагом для выделения белков является осаждение сульфатом аммония (NH4) 2ТАК4. Это осуществляется путем добавления возрастающих количеств сульфата аммония и сбора различных фракций осажденного белка. Впоследствии сульфат аммония можно удалить с помощью диализа.
Как вы буферизуете белки обмена?
Замена буфера, однако, выполняется путем первого уравновешивания со смолой колонки с буфером, в котором должна оказаться проба. В обоих случаях компоненты буфера, переносящие пробу в колонка будет заменена раствором, которым колонка предварительно уравновешена.
Какой из следующих хроматографических методов можно применить для обессоливания белков?
Как упоминалось выше, гель-фильтрация может быть эффективно использована дляобессоливания и достигается путем уравновешивания колонны гель-фильтрации водой. Однако замена буфера выполняется путем уравновешивания смолы колонки с целевым буфером.
