Параформальдегид, как говорят, проницаем для плазматической мембраны во многих случаях в некоторой степени - так как мембрана ядерной оболочки имеет другой химический состав (в основном с точки зрения холестерина) я бы не стал предположим, что это так.
Уменьшает ли фиксация клетки?
Фиксированные белки вокруг отверстий будут удерживать каркас стабильным. Однако любой вид фиксации может привести к небольшому сжатию ваших клеток, которые вы может не заметить.
Что используется для проницаемости клеток?
Пермеабилизация вводится после того, как клетки были подготовлены с помощью фиксирующего агента для инициации перекрестного связывания белков, такого как формальдегид или этанол. … Двумя наиболее распространенными агентами, используемыми для пермеабилизации клеточной мембраны, являются детергенты Triton-X 100 или Tween-20, причем Tween-20 является более мягким из двух.
Что параформальдегид сделал с клетками?
PFA вызывает ковалентные поперечные связи между молекулами, эффективно склеивая их в нерастворимую сеть, которая изменяет механические свойства клеточной поверхности. Предыдущие исследования сообщают, что клеточная поверхность твердеет после обработки фиксатором [7–10].
Как вы повышаете проницаемость клетки?
Проницаемость клеток с помощью фиксации метанолом или ацетоном или с использованием детергента позволяет антителам проходить через клеточныемембрану и проникают в клетку. Наиболее распространенным реагентом, используемым для пермеабилизации клеток, является неионогенный детергент Triton X-100.