Поскольку клеточная стенка устойчива к большинству соединений, кислотоустойчивые организмы требуют специальной техники окрашивания. Первичный краситель, используемый при кислотоустойчивом окрашивании, карбофуксин, является жирорастворимым и содержит фенол, который помогает красителю проникать через клеточную стенку. Этому также способствует добавление тепла.
Почему для кислотоустойчивого окрашивания требуется нагревание?
Нагрев предметного стекла помогает смягчить восковой материал на стенке бактериальной клетки. Воскообразное вещество гидрофобно по отношению к водному раствору, но не к фенольному раствору основного фуксина. Следовательно, сильный карбол-фуксин способен окрашивать клетку. После окрашивания они, как правило, устойчивы к обесцвечиванию 20% H2SO4 (серной кислотой).
Как вы окрашиваете кислотоустойчивые пятна?
Инструкции по кислотостойкому окрашиванию
- Высушите на воздухе и нагрейте, чтобы зафиксировать тонкий слой микроорганизмов. …
- Залейте предметное стекло карбофуксином. …
- Залейте горку кислотным спиртом на 30 секунд. …
- Контрастное окрашивание путем заливки предметного стекла метиленовым синим в течение 30 секунд. …
- Высушите слайд, поместив его между страницами книги из библейской бумаги.
Требуется ли окрашивание по Граму при нагревании?
Окрашивание по Граму обычно выполняется на препарате мазка, который был термофиксирован. Одной из функций фиксации является закрепление (фиксация) клеток на предметном стекле. Однако в биопленке клетки уже прочно прикреплены. Кроме того, фиксированная температурапредметное стекло сухое, но биопленка в основном состоит из воды.
Какое пятно не требует нагревания?
Он включает в себя нанесение основного красителя (основной фуксин), обесцвечивающего вещества (кислотно-спиртовой) и контрастного красителя (метиленовый синий). В отличие от окраски Циля-Нильсена (окраска Z-N), метод Киньюна окрашивания не требует нагревания.
