В последние годы Coriell использовала всю сыворотку, инактивированную нагреванием, для своих клеточных культур, чтобы инактивировать белок комплемента, обнаруженный в сыворотке новорожденных телят. Поскольку мы перешли на эмбриональную бычью сыворотку, мы обнаружили, что инактивация нагреванием не является необходимой для большинства клеточных линий.
Как долго вы нагреваете инактивацию FBS?
Для тепловой инактивации эмбриональной телячьей сыворотки (FBS) предлагается следующий протокол. FBS нагревают до 56±2°С в течение 30±2 минут на водяной бане с перемешиванием. Тепловая инактивация (HI) – процесс, при котором ФБС выдерживают при температуре 56±2° в течение 30±2 минут.
Почему необходима тепловая инактивация FBS перед использованием?
Обычным методом лечения FBS является термоинактивация, при которой FBS нагревают до 56°C в течение 30 минут на водяной бане при периодическом встряхивании. Цель состоит в том, чтобы инактивировать любые компоненты системы комплемента, присутствующие в FBS [24], и другие потенциальные неизвестные ингибиторы роста клеток.
Зачем нагревать инактивирующую сыворотку?
Цель тепловой инактивации состоит в том, чтобы разрушить активность комплемента в сыворотке, не влияя на стимулирующие рост характеристики продукта. Удаление активности комплемента из сыворотки не требуется для большинства клеточных культур, но может быть необходимо для культур, чувствительных к активности комплемента.
Как вы храните FBS, инактивированный теплом?
Защитите размороженные FBS и другие сыворотки с помощью безопасного охлаждения ихранилище. Немедленно используйте размороженную сыворотку. Жидкая FBS и другая сыворотка могут храниться в холодильнике (от 2 до 8 °C) до четырех недель.
