Чем больше молекулярная масса, тем длиннее спираль и тем медленнее движется молекула. Таким образом, электрофорез + SDS разделяет на основе молекулярной массы, а не на основе собственного заряда. Важное примечание: белки одинаковой длины обычно невозможно разделить с помощью гель-электрофореза + SDS.
Как вы разделяете белки одинаковой молекулярной массы?
Центрифугирование, электрофорез и хроматография являются наиболее распространенными методами очистки и анализа белков. Центрифугирование разделяет белки по скорости их осаждения, на которую влияют их масса и форма.
Какие методы разделяют белки по заряду?
Белки можно разделить на основе их суммарного заряда с помощью ионообменной хроматографии. Если белок имеет суммарный положительный заряд при рН 7, он обычно связывается со столбиком шариков, содержащих карбоксилатные группы, тогда как отрицательно заряженный белок этого не делает (рис. 4.4).
Какой из следующих методов лучше всего подходит для разделения белков по молекулярной массе?
Хроматографические методы, основанные на разделении, очень эффективны для разделения и идентификации малых молекул, таких как аминокислоты, углеводы и жирные кислоты. Однако аффинная хроматография (т.е. ионообменная хроматография) более эффективна при разделении макромолекул как нуклеиновых кислот, так и белков.
Какой тип столбцахроматография разделяет белки по молекулярной массе?
Гель-фильтрация (GF) хроматография разделяет белки исключительно на основе молекулярного размера. Разделение достигается с помощью пористой матрицы, к которой молекулы по стерическим причинам имеют разную степень доступа, т. е. молекулы меньшего размера имеют больший доступ, а молекулы большего размера исключаются из матрицы.
